(1)消毒
①菇房消毒：利用旧厂房改造的菇房，培养料进房前3～4天必须用甲醛和敌敌畏进行一次彻底消毒。特别是连续栽培几年的菇房，更应该加强消毒。培养料进房后，还需用甲醛和敌敌畏再进行一次消毒。
消毒可最大限度地减少菇房、床架及培养料中的病虫害。消毒之前，要用砖石、草把、泥浆、报纸等材料把门窗、房顶等裂缝透气处堵严，以增强熏蒸消毒效果。
②大棚消毒：大棚式菇房应在未覆盖薄膜前把土面暴晒，然后洒石灰水、1:500倍多菌灵，进料后再进行一次消毒。
(2)检查栽培种
①看：瓶外部干净，瓶塞完好；瓶内壁菌丝呈放射状，丝体健壮，生命力强；洁白无杂色，无萎缩，无黄水。
②扒：扒菌丝时，感到结合紧密，不松散，不稀黏。
③闻：无异味，有双孢菇香味。
(3)培养料上棚架：菇房消毒完毕，将培养料扒开趁热放在菇床上，用0.5%的敌敌畏加甲醛喷洒料面，进行24小时杀虫。二次发酵的，料厚15～20厘米。
播种时，先将菌种瓶外部，挖菌种的铁勺、镊子，用来盛菌种的盆以及播种人的手，用0.1%高锰酸钾溶液擦洗消毒。然后去掉菌种瓶的棉塞，用镊子夹去瓶口的原种块及少量衰退的菌种块不用。再用浸有高锰酸钾溶液的棉球擦净瓶口，挖出菌种。瓶口细的，可直接打碎瓶子。轻轻把菌种掰碎，切不可搓揉，以免伤害菌丝。
