4、微量元素
双孢菇生长发育还需要微量元素。少量的铁对双孢菇生长有益，并可促进纯培养中双孢菇原基的形成。铜对双孢菇发育是必需的。此外，双孢菇生长还需要微量的钼、锌等元素。
5、维生素
维生素对双孢菇生长非常重要，因为它们是组成各种酶的活性基团的成分。缺少它们，酶就失去活性，生命活动停止。
如维生素b1（硫胺素）是双孢菇生长所必需的生长素，对双孢菇的糖代谢起着重要作用。维生素b1缺乏时，首先抑制双孢菇生长发育；浓度继续降低，菌丝生长受到抑制；如不及时添加，生长便会停止。
对于必要的维生素，双孢菇自己能合成。另外，在天然培养料（如马铃薯、酵母、麸皮等）中维生素含量都比较丰富，因此，培养料中一般不再添加。但当用无机盐合成培养基时，如果能增加一点富含维生素的玉米浆，则有利于双孢菇的生长。
