在南方温暖和北方温室条件下，全年都能繁殖，1年可发生10多代。
在广州地区，从4月份开始，发生数量逐渐上升，以6～10月为害严重，其间气候原因形成多次高峰，常在6月至7月初，8月下旬～9月下旬出现2个为害高峰期，温度超过34℃该虫发生为害受到抑制，11月份以后逐渐下降，12月至翌年3月发生量小。
在北京地区，田间六月初见，7月中旬至9月下旬是主要为害时期，10月上旬后虫量逐渐减少。在保护地种植条件下发生高峰期通常有两个，即春季至初夏和秋冬。该虫在北京地区自然条件下不能越冬，保护地是该虫越冬主要场所。
成虫大部分在上午羽化，上午7时至下午2时是成虫羽化高峰期。羽化后当日即可进行交配。温度越高，交配越早。雌雄虫均可多次交配。成虫取食、产卵一般均在白天进行，夜晚不取食，部产卵。
成虫通过雌虫产卵器在寄主植物叶面上形成的刻点进行取食。无论刻点中是否产了卵，每形成一个刺伤点，雌虫均后退进行取食，因而所有的刻点都可认为是取食孔。雄虫不能形成取食孔，需要通过雌虫造成的刻点进行取食。
幼虫对寄主植物的取食为害造成的损失最大。初孵幼虫即开始取食，用口钩不断刮食叶肉，残留上表皮，形成白色蛇形隧道。幼虫可昼夜取食。幼虫有三龄，随着龄期的增加，虫道不断加粗变长。第三龄幼虫的食物消耗量最大，为害时可见黑色口钩来回刮动叶肉。
幼虫老熟后，多数在叶背面化蛹，也有在叶正面或从叶面落入土中化蛹的。在自然情况下，老熟幼虫脱道和化蛹一般均在上午进行。
成虫对黄色和光有正趋性，成虫飞行能力较弱，一般只能飞行数十米，所以自然的远距离扩散能力弱。主要靠卵、幼虫和蛹随寄主植株、切条、切花、菜叶、带叶的瓜果豆菜或作为瓜果豆菜的铺垫、填充、包装物的叶片，或蛹随盆栽植株的土壤、交通工具等远距离传播扩散。
美洲斑潜蝇天敌资源十分丰富，在北京共发现寄生性和捕食性天敌共17种，其中以幼虫期寄生蜂最多，共10种，幼虫末期和蛹期主要是捕食性天敌，有瓢虫、小花蝽、草蛉、蚂蚁及蜘蛛等。
春季保护地未施药棚室美洲斑潜蝇幼虫被寄生率可达13.8%，夏季露地天敌对斑潜蝇的控制作用更加明显，田间幼虫被寄生率常达60%以上，不施药地块幼虫被寄生率最高可达98.3%。因此，合理施药及采取其他保护和利用天敌十分必要。
